我們以麥克奧迪倒置生物顯微鏡AE2000型號及倒置熒光顯微鏡AE31來舉例，告知您如何一步步正確操作，來使用顯微鏡

首先，請打開麥克奧迪倒置顯微鏡

將顯微鏡插入電源 (1)。將其打開(2)并逐漸將光強(qiáng)度增加到所需水平（顯微鏡右側(cè)的黑色旋鈕）(3)。

瞳距調(diào)整
將樣品放在載物臺板上(4)，然后通過手動旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器(5) 在 10X 物鏡中擺動。
將聚光器滑塊推到中間位置(6)；在標(biāo)準(zhǔn)配置中，此位置不包含用于相襯的照明環(huán)。

首先使用位于顯微鏡(7)兩側(cè)的粗調(diào)焦旋鈕對樣品進(jìn)行對焦。然后通過在“蝴蝶”模式下移動單獨(dú)的目鏡管來調(diào)整瞳距(8)。最后，左右圖像應(yīng)該加入并成為一個圓形圖像。此設(shè)置將允許用戶在放松模式下用雙眼觀察樣本。

屈光度調(diào)整
屈光度調(diào)節(jié)可補(bǔ)償左眼和右眼之間的任何視力差異。首先確保兩個目鏡都在 +/- 零屈光度位置(9)。僅用右眼通過右目鏡觀察(10)。

使用精細(xì)聚焦旋鈕(11) 精確聚焦圖像▼

然后只用左眼通過左目鏡觀察(12)。現(xiàn)在只使用左目鏡的屈光度調(diào)整來聚焦樣品。請勿使用粗調(diào)/細(xì)調(diào)焦旋鈕進(jìn)行此最終調(diào)整。

顯微鏡現(xiàn)在可以根據(jù)用戶的眼睛進(jìn)行完美的雙目觀察，提供標(biāo)本的準(zhǔn)確可視化。

倒置顯微鏡 AE31E 和 AE2000 的明場設(shè)置

聚光鏡是顯微鏡的重要組成部分，可確保均勻和高質(zhì)量的照明以獲得最佳圖像效果。要正確設(shè)置聚光鏡，請確保 10X 物鏡在光路中。將樣品放在平臺板上并通過粗/細(xì)焦點(diǎn)(13) 聚焦樣品。請注意，在倒置顯微鏡中，物鏡（分別是物鏡轉(zhuǎn)換器）在z 方向移動以找到焦點(diǎn)水平。一旦圖像清晰可見，這個焦點(diǎn)水平就是任何進(jìn)一步調(diào)整的參考。嚴(yán)格保持這個位置。

現(xiàn)在將視場光闌（內(nèi)置于照明臂）關(guān)閉 1/3 (14)▼

使用聚光鏡托架(15)左側(cè)的聚光鏡聚焦旋鈕將聚光鏡移動到 z 位置。根據(jù)使用的聚光鏡，將其移至照明臂(16)左側(cè)的 LWD 或 ELWD 位置標(biāo)記。通過目鏡觀察：樣本圖像內(nèi)的照明點(diǎn)應(yīng)具有清晰的邊界。如果沒有，通過再次將聚光鏡托架移動到 z 位置(17) 進(jìn)行輕微校正。

聚光鏡托架(18)前側(cè)的那 2 個對角螺釘有助于將光點(diǎn)居中▼

移動它們，直到光點(diǎn)位于圖像的中間(19)，打開視場光闌，直到整個視場都被照亮 (20)。▼

最后我們必須使用光圈來調(diào)整圖像對比度。使用冷凝器主體前側(cè)的水平儀。水平移動它，直到圖像顯示出良好的對比度和最大的信息(21)▼

孔徑光闌負(fù)責(zé)照明角度，即照明的數(shù)值孔徑（NA）。為獲得最大分辨率，照明的NA 應(yīng)與所用物鏡的 NA 具有相同的值。與麥克奧迪正置生物顯微鏡一樣，我們使用具有長工作距離的聚光鏡，這樣的設(shè)置是不可能的。請自由關(guān)閉光圈，直到圖像對比度令人滿意(22)。 關(guān)閉孔徑光闌會降低分辨率和亮度，但會增加樣本視圖上的對比度和焦深。

在大多數(shù)情況下，通過將孔徑光闌關(guān)閉到 2/3，可以獲得具有適當(dāng)對比度的圖像。

*對于麥克奧迪倒置生物顯微鏡 AE2000 型號，請?zhí)^第 14 至 22 步，直接進(jìn)入相襯設(shè)置章節(jié)▼

在 AE2000 倒置生物顯微鏡上，聚光器位于中央，這些步驟不是必需的（圖 1）。

麥克奧迪倒置顯微鏡 AE31E 和 AE2000 的相差設(shè)置

相襯是一種圖像觀察對比方法，可以使涂片、細(xì)胞培養(yǎng)物和其他未染色標(biāo)本等樣品可視化。
在麥克奧迪倒置顯微鏡中，大多數(shù)培養(yǎng)皿和孔板都用作樣品載體。冷凝器的長工作距離為使用各種容器提供了足夠的空間。
對于相襯，必須使用特別設(shè)計的物鏡。他們的光學(xué)設(shè)計顯示了一個半透明的環(huán)，在物鏡內(nèi)的特定鏡頭上真空金屬化。該環(huán)對應(yīng)于放置在冷凝器滑塊中的合適的環(huán)形環(huán)。一旦兩個環(huán)都對齊到疊加，相襯就可以工作了。

所有相差物鏡都可以通過其綠色標(biāo)簽（國際標(biāo)準(zhǔn)）來識別(23)。

代號Ph0、Ph1等是指環(huán)的物理尺寸。所有相位物鏡也可以在明場中使用（有輕微限制）。

從相襯開始，首先確保設(shè)置了正確的明場。更改為相襯時保持正確的明場設(shè)置。完全打開聚光鏡的孔徑光闌(24)。選擇您喜歡使用的物鏡，并通過分別推動聚光器滑塊(25) 將環(huán)形照明環(huán)帶入光路。

在 倒置顯微鏡 AE31E 和 AE2000中，Ph1 環(huán)覆蓋相位物鏡 10X/20X/40X，而 PhO 以及相應(yīng)的物鏡 4X 是可選的。
現(xiàn)在從目鏡筒中取出一個目鏡。如果在將目鏡拉出時旋轉(zhuǎn)目鏡，則此方法效果最佳。改為插入相位定心望遠(yuǎn)鏡 (CT) (26)。松開定心望遠(yuǎn)鏡(27)上的固定螺釘。通過拉出 CT 的內(nèi)部，您將專注于相差物鏡(28) 內(nèi)的暗環(huán)。
注意：這個聚焦過程必須通過移動定心望遠(yuǎn)鏡的內(nèi)部來完成。請不要觸摸粗/細(xì)調(diào)焦旋鈕▼

在聚焦暗環(huán)的同時，您還將實(shí)現(xiàn)照明環(huán)的圖像，該圖像被投影到同一平面(29)。如果物鏡相位環(huán)（暗）（30）和照明環(huán)（亮）（31）不重疊，請使用麥克奧迪顯微鏡包裝箱內(nèi)隨附的兩個內(nèi)六角扳手。將鑰匙插入相位滑塊(32) 邊緣的埋頭螺釘中。轉(zhuǎn)動按鍵移動滑塊中的照明環(huán)，直到照明環(huán)的圖像與暗相位環(huán)(33) 重疊。

由于 Ph1 環(huán)尺寸適合 10X/20X/40X 物鏡，因此對這些物鏡進(jìn)行了校準(zhǔn)。在 4X 物鏡的情況下，必須使用 Ph0 環(huán)相應(yīng)地對齊適當(dāng)?shù)沫h(huán)。拉出定心望遠(yuǎn)鏡(34)，通過旋轉(zhuǎn)運(yùn)動推入目鏡(35)。如果照明環(huán)的圖像從物鏡中的相位板發(fā)散，則會產(chǎn)生類似于傾

斜照明的低相位對比度圖像。

要將相位環(huán)插入或更換到相位滑塊中，請注意相位環(huán)的方向是否正確（閱讀頂部）。將其邊緣推向柔性燈絲，直至其裝入孔(36)▼

如有必要，使用內(nèi)六角扳手將環(huán)帶移至孔(37) 的中心。稍后將通過上述過程進(jìn)行微調(diào)；請使用 4X 物鏡和 Ph0 環(huán)重復(fù)第(23)到(35)點(diǎn)的步驟。